Método de concentración por sedimentación RITCHIE

Método de concentración por sedimentación RITCHIE

OBJETIVO:

El alumno aprenderá a realizar un método por el cual le será más fácil encontrar parásitos, y utilizara algunos objetos y sustancias que ya conoce y sabe manejar. A sí que de esta manera realizara el método de RITCHIE el cual consistirá en centrifugación, decantación, mezclar con varias sustancias, y observar al microscopio.

FUNDAMENTO:

Este método se basa en la concentración de los quistes y huevos por sedimentación mediante la centrifugación, se necesitaran de algunas sustancias como: éter, formaldehido, y sol salina; que respectivamente nos ayudaran a encontrar los parásitos en las heces.

Este método (RITCHIE) nos proporciona una ventaja muy importante ya que no deforma a los parásitos, y permite el transporte y almacenamiento de la materia fecal procesada antes de ser examinada, esta técnica nos resulta más conveniente en casos de tratamiento o de cierta frecuencia, ya que por el procedimiento que a continuación se realiza es más probable encontrar alguna forma de vida parasitaria.

MATERIAL Y EQUIPO:                                      SUSTANCIAS:

-centrifuga

-tubos de ensaye cónicos                                    -sol. Salina isotónica

-gasa cortada en cuadros                                     -sol. De formaldehido al 10%

-embudos de polietileno                                       -éter

-vasos de precipitados de 50 ml.                         -heces fecales

-aplicadores de madera                                     -yodo lugol   

-pipetas Pasteur con bulbo

-portaobjetos

-cubreobjetos

-microscopio

          

METODO:

a) Con el aplicador de madera se coloca aproximadamente 1 gr. De la materia fecal en el vaso de precipitados, se añaden 10 ml de solución salina y se homogeniza

b)   Se filtra la suspensión a través de la gasa colocada en el embudo recogiendo el filtrado en el tubo cónico.

c)    Se centrifuga la suspensión durante 2 min. a 2000 r.p.m

d)    Se decanta el sobrenadante y se resuspende el sedimento con la solución salina, centrifugando, decantando y resuspendiendo 2 veces más

               

e)   Al último sedimento se agregan 5 ml. De sol. De formaldehido al 10%, se mezcla y se deja reposar durante 10 min.

f)   Se añaden después 0.5 ml. De éter, se tapan los tubos y se agitan energéticamente durante 30 seg.

g)     Se centrifuga durante 2 min. a 2000 r.p.m.

Quistes de entamoeba histolytica

COMENTARIO:

Claro ese fue el resultado para mí ya que es muy parecido y casi en el centro de la primera imagen se puede observar un quiste con aproximadamente 2 o 3 núcleos dentro, y en la segunda imagen hice mi comparación es por eso que mi resultado es ese.

Conclusión:

Al hacer mi comparación yo deduzco que es ENTAMOEBA HISTOLYTICA ya que en este solo se encuentran quistes con 4 núcleos por mucho y en la muestra se observan 3; se aprendió a realizar el método y a identificar quistes y algunos parásitos.

FUENTE DE INFORMACION:

-texto redactado por Q.F.B. Amalia Briones Amador.

- no se sugirió alguna pág. De internet.

Datos:

Alumna: Rubi Joseline Castillo Juárez Grado y grupo: 3”DM” Especialidad: Laboratorista clínico

Profe: Dr. Vicente Martínez Fragoso

          

            

h)    Después de centrifugar se observan 4 capas ( aunque en nuestra muestra no se observaron muy bien estas capas):

>éter en la superficial

>un tapón de restos fecales

>formaldehido

>sedimento en el fondo del tubo, conteniendo los elementos parasitarios.

i) se decanta el sobrenadante.

j) Se introduce la pipeta Pasteur hasta el sedimento, se extrae con cuidado una gota del sedimento y se coloca en el portaobjetos.

 k) Se le añade una gota de lugol y se le coloca el cubreobjetos.

l) Se observa la preparación en el microscopio con los objetivos 10x y 40x.

RESULTADOS:

Al observar al microscopio en el objetivo 10x se identificaron algunos quistes pero en el objetivo 40x no se lograron observar mejor. Se compararon y el resultado fue: